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細胞残骸の除去方法

細胞懸濁液を機械的に溶解すると、多くの細胞断片が生じます。これらの断片を削除するにはどうすればよいでしょうか?さまざまなアプローチを見てみましょう。

1. 希釈法を使用してください。細胞が希釈されると、細胞は増殖する可能性があり、細胞の数はますます増え、それに応じて細胞の残骸もますます少なくなります。
2. 自然沈下もあります。細胞はほとんどの断片よりも早く沈降します: : 細胞懸濁液を遠沈管、細胞の大部分が沈んだら、上層の溶液を吸引し、培養液に加えて細胞を懸濁します。この方法は繰り返し使用でき、毎回顕微鏡で要件を満たしているかどうかを観察できます。
3. 低速遠心機ゴミを除去できます。通常 700g、5 分
4. 遠心分離するとき細胞数が十分である条件下では、通常、上清には壊死や破片が含まれるため、遠心時間を 3 分、1000 rpm ではなく 5 分、1000 rpm に短縮して上清を除去します。この操作は、インキュベーション前の洗浄プロセス中に 1 回実行するだけで済みます。

細胞破片を除去する方法はたくさんありますが、遠心分離が最も効率的な方法の 1 つであることがわかります。

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また、植物の組織や細胞はセルロース、ヘミセルロース、ペクチンからなる細胞壁を持っているため、目的を達成するには一般に珪砂やガラス粉末を適切な抽出液で粉砕したり、セルラーゼで処理したりする必要があります。細菌細胞壁の骨格全体が実際にはペプチドグリカンの嚢胞性高分子の共有結合で構成されており、非常に丈夫であるため、細菌細胞の断片化はより困難です。細菌の細胞壁を破壊する一般的な方法には、超音波破砕、砂粉砕、高圧押出、リゾチーム処理などがあります。組織と細胞が破壊された後、目的のタンパク質を抽出するために適切な緩衝液が選択されます。細胞断片などの不溶性物質は除去されます。遠心または濾過。

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投稿日時: 2023 年 7 月 24 日